Θέματα & Λύσεις -> Βιολογία Θετικών Σπουδών Γ΄ Λυκείου

Βιολογία Θετικών Σπουδών – Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ

3’ CUUAAGAG 5’

3’ AUCGAAUU 5’

CAACTTAAGAATCGAATTCAGCCCGTACTTAAGAG

5’ GUUGAAUU 3’

5’

3’

συνεχής αλυσίδα

ασυνεχής αλυσίδα

DNA ελικάσες

διχάλα

GTTGAATTCTTAGCTTAAGTCGGGCATGAATTCTC

5’

συμπεραίνουμε ότι η 1

αλυσίδα αντιγράφεται με ασυνεχή και η 2

αλυσίδα με

συνεχή τρόπο.

Δ3.

Οι περιοριστικές ενδονουκλεάσες παράγονται από βακτήρια και ο

φυσιολογικός τους ρόλος είναι να τα προστατεύουν από την εισβολή «ξένου»

DNA. Οι περιοριστικές ενδονουκλεάσες αναγνωρίζουν ειδικές αλληλουχίες 4-8

νουκλεοτιδίων στο δίκλωνο DNA. Μία από τις περιοριστικές ενδονουκλεάσες

που χρησιμοποιείται ευρέως είναι η EcoRI που απομονώθηκε από το βακτήριο

Escherichia coli.

Το ένζυμο αυτό όποτε συναντά την αλληλουχία

5'-G Α Α Τ Τ C-3'

3'-C Τ Τ A A G-5'

στο γονιδίωμα, κόβει κάθε αλυσίδα μεταξύ του G και του Α (με κατεύθυνση



3') αφήνοντας μονόκλωνα άκρα από αζευγάρωτες βάσεις στα κομμένα

άκρα.

Θα επιλέξουμε το πλασμίδιο Α γιατί εκεί μόνο υπάρχει η αλληλουχία

5’GAATTC 3’ με την κατάλληλη κατεύθυνση 5' → 3'.

Επειδή η EcoRI κόβει κάθε αλυσίδα μεταξύ του G και του Α σπάζοντας 1

φωσφοδιεστερικό δεσμό (φ.δ.), συνολικά θα διασπαστούν 2 φ.δ. στο

πλασμίδιο. Όταν θα αναμιχθούν το DNA του πλασμιδίου με το DNA του

παραπάνω τμήματος κατά το σχηματισμό του ανασυνδυασμένου πλασμιδίου,

η DNA δεσμάση θα καταλύσει το σχηματισμό 4 φ.δ.

CTTAAG

5΄

3΄

CTTAAG

GAATTC

5΄

3΄

GAATTC