Background Image
Previous Page  62 / 264 Next Page
Information
Show Menu
Previous Page 62 / 264 Next Page
Page Background

63

Βιολογία Θετικών Σπουδών – Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ

Έτσι τα πιθανά ανασυνδυασμένα μόρια DNA θα είναι 2, με βάση την

κατεύθυνση των αλυσίδων τους. Δηλαδή στο

υβριδοποιημένο μόριο 1

το

τελευταίο νουκλεοτίδιο στο 3΄ άκρο στην αλυσίδα 1 (πάνω) που φέρει ως

αζωτούχο βάση τη G, έχει στο 3΄ άκρο του ελεύθερο υδροξύλιο και θα ενωθεί

με 3΄ - 5΄ φωσφοδιεστερικό δεσμό με τη φωσφορική ομάδα που έχει στο 5΄

ελεύθερο άκρο του το νουκλεοτίδιο που φέρει ως αζωτούχο βάση την Α από

το

υβριδοποιημένο μόριο 2

. Ομοίως, το νουκλεοτίδιο που φέρει ως αζωτούχο

βάση την Α στο 5’ άκρο της αλυσίδας 3 (κάτω) στο

υβριδοποιημένο μόριο 1

έχει ελεύθερη τη φωσφορική ομάδα που θα ενωθεί με 3’ – 5’

φωσφοδιεστερικό δεσμό με το νουκλεοτίδιο C ή G που υπάρχει στο 3’

ελεύθερο άκρο της αλυσίδας 2 ή 4 αντίστοιχα, στο

υβριδοποιημένο μόριο 2

.

Είναι προφανές από τα παραπάνω ότι το

υβριδοποιημένο μόριο 2

, βάσει της

κατεύθυνσης των αλυσίδων του, μπορεί να ενωθεί με 2 τρόπους με το

υβριδοποιημένο μόριο 1

, γι’ αυτό και προκύπτουν 2 διαφορετικά

ανασυνδυασμένα μόρια.

Έτσι :

Ανασυνδυασμένο μόριο 1:

5΄- AAATGAAACCAGGATAAG

AATTCGGGGGGC

-3΄

3΄- ΤΤΤΑCTTTGGTCCT ATTCTTAA

GCCCCCCGTTAA

-5΄

Ανασυνδυασμένο μόριο 2:

5΄- AAATGAAACCAGGATAAG

AATTGCCCCCCG

-3΄

3΄- ΤΤΤΑCTTTGGTCCT ATTCTTAA

CGGGGGGCTTAA

-5΄

Γνωρίζουμε ότι η EcoRI, που απομονώθηκε από το βακτήριο

Escherichia coli

,

όποτε συναντά την αλληλουχία:

5'-G Α Α Τ Τ C-3'

3'-C Τ Τ A A G-5'

στο γονιδίωμα, κόβει κάθε αλυσίδα μεταξύ του G και του Α (με κατεύθυνση

5'→3') αφήνοντας μονόκλωνα άκρα από αζευγάρωτες βάσεις στα κομμένα

άκρα.

Η αλληλουχία αυτή υπάρχει μία φορά στο ανασυνδυασμένο μόριο 1, οπότε

και προκύπτουν μετά τη δράση της δύο διαφορετικά μόρια DNA. Δηλαδή:

5΄- AAATGAAACCAGGATAAG

AATTCGGGGGGC

-3΄

3΄- ΤΤΤΑCTTTGGTCCT ATTCTTAA

GCCCCCCGTTAA

-5΄