202 / 264
203
Βιολογία Θετικών Σπουδών – Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ
Γενικά τα βακτήρια - ξενιστές δέχονται σε μικρό ποσοστό πλασμίδια, μερικά
από τα οποία είναι ανασυνδυασμένα, ενώ άλλα όχι. Συνήθως
χρησιμοποιούνται ως ξενιστές, βακτήρια που δεν έχουν πλασμίδια και
επομένως είναι ευαίσθητα σε αντιβιοτικά. Η επιλογή των βακτηρίων που
δέχτηκαν ανασυνδυασμένο ή μη πλασμίδιο στηρίζεται στην ικανότητα
ανάπτυξής τους παρουσία αντιβιοτικού, επειδή το ανασυνδυασμένο
πλασμίδιο περιέχει ένα ή περισσότερα γονίδια που τους προσδίδουν
ανθεκτικότητα στα συγκεκριμένα αντιβιοτικά. Έτσι, τα μετασχηματισμένα (με
ανασυνδυασμένο ή μη ανασυνδυασμένο πλασμίδιο) βακτήρια όπως και αυτά
που δεν έχουν δεχθεί πλασμίδιο αναπτύσσονται σε ένα επόμενο στάδιο σε
στερεό θρεπτικό υλικό στο οποίο έχουν προστεθεί και τα αντιβιοτικά
στρεπτομυκίνη και αμπικιλίνη (ένα μόνο ή συνδυασμός και των δύο). Κάθε
βακτήριο που προσέλαβε ένα μόνο πλασμίδιο (ανασυνδυασμένο ή μη)
πολλαπλασιάζεται και παράγει μια αποικία που αποτελεί έναν βακτηριακό
κλώνο καθώς θα εμφανίζει ανθεκτικότητα στα παραπάνω αντιβιοτικά, ενώ
αντίθετα τα βακτήρια που δεν προσέλαβαν πλασμίδιο, δεν παρουσιάζουν
ανθεκτικότητα στα αντιβιοτικά αυτά και έτσι δεν επιβιώνουν.
Δ3.
Γνωρίζουμε ότι τόσο η κωδική αλυσίδα του DNA όσο και το mRNA, είναι
συμπληρωματικά προς τη μεταγραφόμενη αλυσίδα του DNA. Έτσι, η μόνη τους
διαφορά είναι ότι όπου στην κωδική αλυσίδα υπάρχει Τ στο mRNA υπάρχει U.
Εφόσον το κωδικόνιο έναρξης του mRNA είναι το AUG με κατεύθυνση 5’AUG
3’, το αντίστοιχο κωδικόνιο στην κωδική αλυσίδα του DNA θα είναι το ATG και
θα έχει κατεύθυνση 5’ ATG 3’. Επίσης, εφόσον τα κωδικόνια λήξης του mRNA
είναι τα 5’ UAG 3’ ή 5’ UGA 3’ ή 5’ UAA 3’, τα αντίστοιχα κωδικόνια στην
κωδική αλυσίδα του DNA θα είναι τα 5’ ΤAG 3’ ή 5’ ΤGA 3’ ή 5’ ΤAA 3’. Τέλος, οι
βάσεις ανάμεσα στο κωδικόνιο έναρξης και το κωδικόνιο λήξης θα πρέπει να
διαβάζονται ανά τριάδες (κώδικας τριπλέτας), συνεχόμενα χωρίς να
παραλείπεται κάποιο νουκλεοτίδιο (συνεχής), καθώς κάθε νουκλεοτίδιο
ανήκει σε μία μόνο τριπλέτα (μη επικαλυπτόμενος). Επίσης, στο συγκεκριμένο
τμήμα είναι γνωστός ο προσανατολισμός των αλυσίδων από την – ΟΗ (3’
άκρο) της αλυσίδας Ι.
Συνεπώς η κωδική του αλυσίδα είναι η Ι (πάνω) αλυσίδα, με κατεύθυνση από
δεξιά προς τα αριστερά (3’
5’).
Αλυσίδα Ι
3’ GCCAATATTA AAT GAG CAT GCC GTA GGAATATTCGG 5’ κωδική
Αλυσίδα ΙΙ
5’ CGGTTATAAT TTA CTC GTA CGG CAT CCTTATAAGCC 3’
μη κωδική
Η RNA πολυμεράση προσδένεται στον υποκινητή με τη βοήθεια μεταγραφικών
παραγόντων και προσθέτει συμπληρωματικά ριβονουκλεοτίδια έναντι των
δεοξυριβονουκλεοτιδίων της μη κωδικής αλυσίδας ενώνοντάς τα με 3’ – 5’